조직 처리는 조직학의 초석으로, 신선한 생물학적 샘플을 현미경 검사를 위해 준비된 안정적인 파라핀 내장 표본으로 변형시킵니다. 고정, 탈수, 청소, 침투 및 임베딩과 같은 복잡한 시퀀스는 연구원, 병리학 자 및 임상의가 세포 및 분자 구조를 연구하고 의료 연구 및 진단을 발전시킬 수 있도록합니다. 그러나 모든 단계에서의 실수는 결과를 손상시켜 조직 왜곡, 불량 섹션 또는 진단 잠재력 손실을 초래할 수 있습니다. 이 포괄적 인 가이드에서는 조직 처리, 원인 및 품질 결과를 보장하기위한 실용적인 솔루션의 일반적인 문제를 탐구합니다. 실험실 기술자, 생물 의학 연구원 또는 병리학 전문가이든, 이러한 과제를 습득하는 것은 성공을 위해 필수적입니다.
정밀도는 조직학 조직 처리에서 중요하지만, 인간 오류, 부적절한 기술 또는 장비 제한으로 인해 문제가 자주 발생합니다. 아래에서는 조직의 수축, 샘플의 공기 유지, 삽입 또는 침투 불량과 같은 세 가지 일반적인 문제를 검토하여 작업 흐름을 최적화하기위한 원인과 솔루션을 설명합니다.
조직 수축은 조직학의 일반적인 장애물로, 종종 세포 구조를 왜곡하고 정확한 현미경 분석을 방해합니다. 연구에 따르면 조직은 파라핀에 내장 될 때까지 20% 이상 수축되어 형태 및 진단 신뢰성에 영향을 줄 수 있습니다. 이 문제는 포르말린과 같은 고정제가 완전히 침투하지 못하거나 너무 짧게, 일반적으로 6-24 시간 미만으로 적용되어 조직이 부적절하게 경화될 때 발생합니다. 70% 100% 너무 빨리 점프하는 것과 같은 에탄올 용액을 통한 급속한 탈수는 물을 과도하게 추출하여 조직을 뒤틀었습니다. 왁스 침투 중 과도한 열 (종종 60 ° C 이상) 은 섬세한 샘플을 과도하게 경화하거나 축소하여 품질을 저하시킵니다.
고정 최적화: 인산염 완충 포르말린 용액을 사용하여 단백질을 가교하여 조직을 안정화시켜 3 차원 구조를 보존합니다. 샘플 크기에 따라 고정을 위해 6 ~ 24 시간을 허용하고 왜곡을 최소화하기 위해 균일 한 침투를 위해 부드러운 교반을 사용하여 더 크거나 밀도가 높은 조직에 대해이를 확장하십시오.
탈수 조절: 점진적인 에탄올 시리즈 (70%, 90% 및 100%, 15 ~ 45 분 단계) 를 따라 천천히 물을 제거하여 뒤틀림을 피하십시오. 각 단계를 모니터링하여 잔류 물을 방지하여 조직이 부서지기 쉽거나 부드러워 질 수 있습니다.
온도 관리: 왁스 침투를 60 ° C 이하로 유지하고 과열을 피하기 위해 센터 핫 플레이트 및 왁스 저장소를 정기적으로 점검하여 분석을위한 신뢰할 수있는 고품질 섹션을 보장합니다.
조직 샘플의 보유 공기는 공극을 생성하고, 침투를 방해하며, 특히 폐 또는 뼈와 같은 다공성 또는 조밀 조직에서 고르지 않은 절단을 유도합니다. 이 문제는 종종 샘플이 고정 장치에 완전히 잠기지 않고 시약 침투를 차단하고 기포를 포획하는 고정 중에 시작됩니다. 자동화 된 티슈 프로세서, 특히 유체 전달 모델의 부적절한 진공 사이클은 공기를 제거하지 못하여 품질을 저하시킵니다. 조밀하거나 다공성 조직은 공기 주머니가 지속되어 균일 한 처리 및 하류 분석을 방해하기 때문에 특히 쉽습니다.
수정 고정 설정: 수집 직후 포르말린과 같은 고정제에 조직을 완전히 침지시켜 완전한 적용 범위를 보장합니다. 폐와 같은 다공성 샘플의 경우 고정 중에 진공 챔버 또는 부드러운 교반을 사용하여 갇힌 공기를 제거하여 포켓이 지속되지 않도록합니다.
최신 프로세서 사용: Leica Peloris와 같은 유체 전달 티슈 프로세서 활용™그리고 HealthSky's티슈 프로세서 기계, 특히 조밀 한 조직에서 공기를 제거하는 진공 및 압력 사이클. 최적의 결과를 위해 샘플 유형에 맞게 충분한 진공 시간을 프로그래밍하십시오.
트림 및 유지: 해부 중에 샘플을 4mm 이하로 자르면 고정 및 시약 접근을 용이하게하여 공기 보유를 줄입니다. 부드럽고 고품질의 섹션을 위해 고르지 않은 얼룩과 같은 공기 관련 문제를 발견하도록 장비를 유지하고 직원을 교육하십시오.
빈약 한 임베딩 또는 침투는 부드럽고 흐릿하거나 고르지 않은 블록을 생성하여 마이크로 톰 절단을 어렵게 만들고 상세한 분석을 방해합니다. 이 문제는 탈수가 불완전하여 왁스 침투를 차단하는 잔류 물을 남기거나 자일렌과 같은 제거제가 에탄올을 완전히 대체하지 못해 침투를 손상시킬 때 발생합니다. 즉석Misaligns 조직을 삽입하는 동안 r 방향, 주요 구조를 가리는 반면, 품질이 낮거나 불순한 파라핀은 단단하고 분리 가능한 블록에 필요한 일관성이 부족하여 품질에 영향을 미칩니다.
철저한 탈수 보장: 점진적인 에탄올 시리즈 (70%, 90% 및 100%, 15 ~ 45 분) 를 사용하여 모든 무료 물을 제거하십시오. 청산하기 전에 잔류 수분을 점검하여 연조직을 방지하고 준비 상태를 유지하십시오.
클리어링에 초점: 여러 자일렌 변화 (20, 20, 45 분) 를 통해 조직을 실행하여 에탄올을 완전히 대체하거나 이소프로판올과 함께 자일렌이없는 프로토콜을 사용하십시오. 완전한 제제 제거를 위해 왁스 온도를 60 ℃보다 약간 높게 조정한다.
오리엔트 및 사용 품질 왁스: 단면의 평면이 중요하기 때문에 연구 또는 진단 목표에 부합하기 위해 표본 설명을 참조하면서 주형에서 조심스럽게 조직을냅니다. 경도 및 탄성을 위해 스티렌과 같은 첨가제로 프리미엄 파라핀 왁스에 투자하여 얇은 2 µm 섹션과 리본을 사용할 수 있습니다.
검사 및 기차: 지속적으로 왁스 품질 및 온도 제어를 위해 임베딩 센터를 검사합니다. 직원을 훈련시켜 조직을 부드럽고 정확하게 처리하여 염색 및 현미경을위한 안정적이고 단면 가능한 블록을 생성합니다.
조직 처리에서 실수를 예방하는 것은 특히 손상된 샘플이 진단과 환자의 고통을 초래할 수없는 진단에서 중요합니다. 오류는 종종 빈약 한 스케줄링, 부적절한 고정 또는 무시 된 시약으로 인해 발생합니다. 이를 피하기 위해 처리 일정을 조직 유형 및 크기와 일치시킵니다. 유방 조직과 같은 크고 지방이 많은 샘플이나 작은 생검을위한 긴 샘플의 경우 짧은 실행을 피하십시오. 수집 직후 포르말린에 표본을 수정하고 필요한 경우 프로세서에 추가 시간을 추가합니다. 같은 도구를 사용하여 엄격한 지침 당 에탄올, 자일렌 및 왁스를 교체하십시오.라이카 바이오 시스템 PELORIS품질 관리를 위해. 왁스를 녹일 수있을만큼 따뜻하게 가열 된 집게를 사용하여 골절을 피하기 위해 매립 중에 조직을 부드럽게 처리하십시오. 인적 오류를 줄이기 위해 해부에서 임베딩까지 기술을 철저히 훈련하십시오. 이 단계는 견본을 보호하여 연구 및 진단을위한 신뢰할 수있는 결과를 보장합니다.
고품질 조직 가공은 건전한 절차, 양질의 재료 및 세심한 관리가 필요합니다. Tailor는 4mm 샘플에 대해 6 시간 동안 실행하여 더 크거나 밀도가 높은 조직을 조정하는 것과 같이 조직 크기와 유형을 예약합니다. 균일하고 빠른 결과를 위해 진공/압력 사이클과 유체 순환이있는 최신 프로세서에 투자하십시오. 일관성을 위해 자동 경고를 활용하여 에탄올, 제거제 및 왁스를 정기적으로 새로 고칩니다. 품질을 유지하기 위해 이소프로판올과 같은 더 안전한 자일렌이없는 옵션을 사용하십시오. 열 손상을 방지하기 위해 매립 센터 핫 플레이트 및 왁스 저장소를 확인하십시오. 정확한 단면 평면을위한 금형에 정확하게 동양 조직. 경도와 탄성을위한 첨가제가 함유 된 프리미엄 파라핀을 선택하여 얇고 리본과 같은 섹션을 가능하게합니다. 문서 처리 실행, 시약 변경 및 장비 검사 문제 해결. 이러한 관행은 절단, 염색 및 분석을 위해 일관되고 고품질의 파라핀 내장 표본을 제공합니다.
헬스 스카이액체 기반 세포 장비깨끗하고 잘 보존 된 세포 샘플을 전달하여 진단 정확도를 높이도록 설계되었습니다. 고급 처리 시스템은 슬라이드에서 셀 분포를 보장하여보다 정확한 평가를 지원하고 이상을 놓칠 가능성을 줄입니다. 임상 실험실에 이상적이며 일상적인 세포 학적 검사에 일관성과 명확성을 제공합니다.