고정은 조직 처리의 초석이며, 조직학에서 현미경 검사를위한 생물학적 샘플을 준비하는 데 필수적입니다. 이 중요한 과정은 조직 구조를 보존하고, 분해를 방지하며, 세포 및 분자 특징에 대한 상세한 분석을 가능하게하여 의학 연구 및 진단의 발전을 유도합니다. 실험실 기술자, 생물 의학 연구원 또는 병리학자이든, 고정 기술과 모범 사례를 습득하는 것은 고품질 결과를 달성하는 데 필수적입니다. 이 포괄적 인 가이드에서는 고정이 무엇을 수반하는지, 그 목적, 사용되는 고정제의 유형, 주요 프로토콜 및 타이밍 고려 사항을 탐구합니다. 조직학에서 성공적인 고정의 비밀을 풀려면 계속 읽으십시오.
고정은 조직 가공의 첫 번째 단계를 나타내며, 고정제로 알려진 화학적 또는 물리적 작용제가 새로운 생물학적 샘플에 적용되어 구조 및 조성을 보존합니다. 환자 또는 실험 동물로부터 수집 된 신선한 조직은 내인성 효소가 세포 성분을 분해하는자가 분해와 박테리아가 분해를 일으키는 부패가 발생하기 쉽습니다. 고정은 단백질, 지질 및 기타 세포 요소를 안정화시켜 생체 내 조건에 가능한 한 가깝게 상태를 유지함으로써 이러한 분해 과정을 중단시킵니다. 이 보존은 탈수, 제거, 침투 및 임베딩과 같은 후속 단계에 매우 중요하며, 이는 얇은 절단 및 현미경 분석을 위해 조직을 준비합니다. 부패와 조직 경화를 통해 연구자와 임상의는 세포 세부 사항을 연구하고 질병을 진단하며 정밀하고 신뢰성으로 생물 의학을 발전시킬 수 있습니다.
고정은 조직학에서 여러 가지 필수 기능을 제공하며 간단한 보존을 넘어 품질 결과를 보장합니다. 단백질을 가교함으로써 조직의 3 차원 구조를 안정화시키고, 이후 처리 단계에서 붕괴 또는 왜곡을 방지하며, 이는 현미경으로 세포 형태를 관찰하는 데 필수적입니다. 이 과정은 또한자가 분해 및 박테리아 성장을 억제하여 중요한 특징을 가릴 수있는 효소 및 미생물 분해로부터 조직을 보호합니다. 또한 고정은 조직 경도를 향상시켜 미세 절제술을 통해 샘플을 더 쉽게 처리하고 얇고 일관된 섹션으로 절단합니다. 또 다른 중요한 역할은 분석용 세포 구조 또는 분자를 강조하기 위해 헤마토실린 및 에오신 (H & E) 과 같은 특정 염색 기술을 허용하는 화학적 반응성을 유지하는 것입니다. 효과적인 고정이 없으면 조직이 분해되어 조직 학적 연구 및 진단 결과의 신뢰성을 약화시키므로이 단계를 조직학 워크 플로에서 필수 불가결하게 만듭니다.
특정 조직, 연구 목표 또는 진단 요구에 맞는 고유 한 특성을 가진 다양한 고정제가 조직학에 사용됩니다. 고정제의 선택은 보존 품질, 염색 호환성 및 다운 스트림 분석에 직접적인 영향을 미칩니다. 아래에서는 조직 처리에 사용되는 가장 일반적인 유형을 살펴 봅니다.
10% 중성 완충 포름 알데히드 용액 인 Formalin은 조직학에서 금본위입니다. 조직을 효과적으로 관통하고 구조를 보존하기 위해 단백질을 교차 연결하며 다양한 얼룩과 잘 작동하므로 일상적인 의료 및 연구 응용 분야에 이상적입니다. 인산염 완소는 조직에 해를 끼칠 수있는 pH 이동을 방지하여 파라핀이 내장 된 섹션에 대한 일관된 결과를 보장합니다. 그러나 장기간 노출은 조직을 과도하게 경화시킬 수 있으므로 신중한 타이밍이 필수적입니다.
70% 에탄올 또는 Carnoy 용액 (에탄올, 클로로포름 및 아세트산의 혼합물) 과 같은 알콜 고정제는 글리코겐과 같은 특정 성분의 빠른 침투 및 보존을 위해 높이 평가됩니다. 에탄올은 작고 섬세한 샘플에 적합한 반면 Carnoy는 분자 연구에서 인기있는 핵산 고정에 탁월합니다. 이들 고정제는 또한 조직을 탈수시키지만, 과고정은 샘플을 수축시키거나 취성시킬 수 있어, 면밀한 모니터링이 필요하다.
강력한 가교제 인 글루타르알데히드는 초구조의 우수한 보존을 위해 전자 현미경에 널리 사용됩니다. 단백질과 지질을 예외적으로 잘 고정하지만 천천히 침투하여 일부 얼룩을 방해 할 수 있고 과잉을 제거하기 위해 더 긴 세척이 필요하기 때문에 일상적인 조직학에 덜 일반적입니다. 다른 옵션으로는 picric acid, formalin 및 아세트산을 결합한 Bouin의 솔루션이 있는데, 이는 배아 나 고환과 같은 연조직에 탁월하지만 DNA를 분해 할 수 있습니다. B-5 같은 수은 염화물 기반 고정제는 혈액 학적 샘플에 대한 날카로운 핵 세부 사항을 제공하지만 독성이 있으며 안전 문제로 인해 덜 사용됩니다. 동결 건조 또는 열 고정과 같은 물리적 방법은 화학적 고정제가 조직학을 지배하지만 특수한 경우에 사용됩니다. 올바른 고정제를 선택하는 것은 조직 유형, 연구 목표 및 subse와의 호환성에 따라 다릅니다.Quent 단계.
효과적인 고정은 조직 품질을 손상시키지 않고 최적의 보존을 달성하기 위해 잘 설계된 프로토콜과 정확한 타이밍을 요구합니다. 프로토콜은 조직 유형, 크기, 고정 선택 및 의도 된 분석에 따라 다르지만 타이밍은 침투 및 화학 반응의 균형을 유지합니다. 다음은 성공적인 고정을위한 주요 고려 사항 및 모범 사례입니다.
즉시 고정: 자동 분해를 방지하기 위해 수집 후 즉시 고정을 시작하십시오. 10% 중성 완충 포르말린과 같은 고정제에 조직을 10:1 고정-조직 대 부피 비율로 침지시켜 처음부터 구조를 보존하는 데 중요한 철저한 침투를 보장합니다.
맞춤형 타이밍: 4mm 미만의 생검과 같은 작은 샘플은 6-12 시간 내에 적절하게 고정 될 수 있지만 장기와 같은 더 큰 표본은 24 시간 이상이 필요합니다. 고정하에 조직이 부드럽고 분해되기 쉬운 반면, 포르말린 또는 글루타르알데히드를 사용한 과고정은 과도하게 경화되어 염색 친화력을 감소시킬 수 있습니다.
온도 제어: 대부분의 경우 실내 온도 (20-25 ° C) 에 고정하여 효과적이고 안전합니다. 37 ° C와 같은 부드러운 가열은 조밀 한 조직의 침투를 가속화 할 수 있지만 섬세한 구조의 손상이나 왜곡을 방지하기 위해 과도한 열을 피할 수 있습니다.
프로세서 통합: 자동화조직 처리 장비종종 첫 번째 스테이션으로 고정 단계를 포함하여 여러 샘플을 처리하는 실험실의 워크 플로를 간소화합니다. 특히 포르말린 고정 조직의 일상적인 조직학에 일관성을 유지하기 위해 이들을 사용하십시오.
샘플 준비: 특히 뇌나 유방과 같은 고밀도 또는 지방 샘플의 경우 더 나은 고정 침투를 위해 조직을 4-5mm 두께로 다듬습니다. 프로세서의 동요 또는 진공 사이클은 침투를 향상시켜 품질을 희생시키지 않고 고정 시간을 줄일 수 있습니다.
특수 프로토콜: 전자 현미경의 경우 2-6 시간 동안 2.5% 글루타르알데히드를 사용하고, 이어서 완충액을 세척하여 초구조를 보존한다. 분자 연구를 위해 Carnoy 또는 에탄올 (1-2 시간) 에 의한 신속한 고정은 유전자 분석 요구를 충족시키는 DNA와 RNA를 보호합니다.
고정 후 처리: 고정 후, 삽입 영역을 선택하는 데 필요한 경우 조직을 해부하여 처리를 위해 라벨이 지정된 카세트에 넣습니다. 이는 다운스트림 섹션 및 분석을 위한 정확한 추적 및 정렬을 보장한다.
안전 및 문서: 실험실 직원을 보호하기 위해 특히 염화 수소와 같은 독성 고정제를 사용하여 안전 지침을 준수하십시오. 문서 고정 시간, 고정 유형 및 일관성을 모니터링하고 문제를 해결하여 신뢰할 수있는 결과를 보장합니다.
헬스 스카이액체 기반 세포학 장비자궁 경부암 검사 및 세포 학적 분석을위한 고급 및 효율적인 솔루션을 제공합니다. 특수 액체 배지를 사용하여보다 명확하고 일관된 현미경 평가를 위해 세포 샘플을 보존합니다. 자동화 된 시스템은 균일 한 샘플 준비와 빠른 처리 시간을 보장하므로 정확성과 생산성에 중점을 둔 현대 세포학 실험실에 신뢰할 수있는 선택입니다.
EN
jp 
ko 
fr 
de 
pt 
ar 
es 
ru 
fa 
id 
